1、1.原理
含有自由醛基或是酮基的还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5-硝基杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比例。
2、1.试剂
除非另有说明，在分析中仅使用确认为优级纯的试剂。
2.1标准品：氨基葡萄糖盐酸盐（》=99%）
3、3溶液配制
3.1 3.5-二硝基水杨酸(DNS)试剂的配制：将酒石酸硝钾钠185g溶于500ml蒸馏水中，加热向热水中依次加入3，5-二硝基水杨酸6.3g,氢氧化钠21g,重洁晶苯酚5g,亚硝酸钠5g,搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000ml,处于棕色瓶中备用。
.2氨基葡萄糖盐标准溶液：标准配置0.1mg/ml,0.2mg/ml,0.3ng/ml,0.4mg/ml,0.5mg/ml,0.6mg/ml的氨基葡萄糖盐酸盐标准溶液。
4、4标准曲线绘制
4.1 取2ml氨基葡萄糖盐酸盐标准溶液加入1.5mlDNS试剂，沸水浴中加热5min,冷却后定容至25ml,540nm下测定吸光度值，绘出标准曲线
5、5样品测定
5.1壳寡糖的水解：取10-50mg壳寡糖于具塞试管中，加入2ml溶解，然后在冰水浴里向管中慢慢加入4ml浓硫酸，加盖摇均匀，在90摄氏度水浴中水解2h,取出冰水迅速冷却，将降解溶液转入100ml的容量瓶中，并在冰水浴中用10 mol/L的NaOH溶液中和至中性，用蒸馏水定容至刻度，摇均匀，作为待测液。取2ml 壳寡糖水解液加入1.5mlDNS试剂，沸水浴中加热5min,冷却后定容至25ml,540nm下测定吸光度值。
6结果计算
W(%)=m*f*0.994*100%/M
式中：m -由标准曲线查得的盐酸氨基葡萄糖的质量，mg;
f -测定过程中样品溶液稀释倍数;
M -壳寡糖样品的质量，mg;
0.994 -单糖折成多糖的系数。
7 允许误差
实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得含有自由醛基或酮基的超过算术平均值的5%。
