微生物培养步骤及平板划线要注意哪些问题

1、有些微生物的培养在样品处理时要稀释几个浓度梯度，一般是6个梯度。首先将样品在无菌的环境里面剪碎，然后在电子天平上称量1.00g，倒入装有9ml的生理盐水的试管中，再放到旋涡混合仪上震动均质。6邗锒凳审个梯度的每个试管装9ml的生理盐水，然后用移液枪从上一个浓度吸1ml到一个浓度，这就是浓度梯度稀释。

3、培养基加入样液后进行涂布。涂布是用三角涂布棒弄的，需要注意的问题是在涂布前要在酒精灯上灼烧涂布棒（杀菌），等待涂布棒冷却后才能在培养基上涂布。如果涂布棒温度太高会把菌烫死，这样培养基上就长不出细菌了。

5、划线分离纯化的时候是从上面涂布得到的细菌中，用接种环挑取一个单菌落，在培养基上划z型的线，划线示意图如下。